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引物合成纯化方法选择指南

为了取得高纯度的终端产品,需要对初步合成引物进行纯化,纯化是寡核苷酸合成产品质量的关键,澳门巴黎人赌场生物目前可进行HAP(澳门巴黎人赌场专利)、PAGE、ULTRAPAGE及HPLC及HPLC_CE纯化。

澳门巴黎人赌场生物不同纯化方式的介绍

参数

纯化方法

基本介绍 特点
HAP 是澳门巴黎人赌场生物自主研发的新型Oligo DNA纯化方法。HAP方法和HAP纯化柱已取得国家专利。其原理是利用合成引物5’ 端DMT基团对HAP树脂专一性吸附、而不含DMT短链DNA不被吸附,从而达到分离纯化的目的。 速度快、价格低
PAGE 是使用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,对DNA片段进行分离,然后从凝胶中回收目的DNA的方法。 性价比高、质量稳定
ULTRAPAGE PAGE纯化方式进行升级优化,即在PAGE纯化的同时配合质谱对DNA进行定性分析,以保证回收片段的正确性。 质量稳定、准确率高
HPLC 是使用高效液相色谱的原理,依据DNA的疏水性来分离产物的。 自动化程度高、纯度好
HPLC_CE 即在HPLC纯化基础上增加毛细管电泳(CE)检测。 色谱加毛细管电泳双重精制,纯度最好

不同纯化方式的应用范围

应用 纯化方法
HAP PAGE ULTRAPAGE HPLC HPLC_CE (IVD)
普通PCR/RT-PCR
测序
全基因合成
多重PCR/定量PCR
诊断PCR扩增
高通量测序(NGS)
亚克隆,点突变
基因构建/RNA干扰
PCR产物用于克隆表达研究或基因重组等
反义核酸
修饰或标记引物/化学或物理应用
体外诊断应用

“√” 表示推荐的纯化方式